自2010-07-22创办以来，北京百普赛斯生物科技有限公司始终秉承“用心服务客户来赢得口碑和利益”的经营理念，并始终处于高速而稳健的发展态势。截止目前，百普赛斯生产的PD1产品，已远销、、、、、等地区。 延伸拓展 产品详情：FOLR1蛋白；叶酸受体1（FOLR1）重组蛋白有几个疑点：1、表达量如何？2、超声过程中注意冰水浴了吗？3、“蛋白条带由1条变成3条”是不是说表达后的全菌电泳目标蛋白是一条带，而在超声或溶菌酶处理后这1条带降解成了3条？4、降解成的3条带中还有原来的融合蛋白条带吗，量如何？5、变性纯化后的纯度如何？6、能否把相关电泳图发上来看看？答：蛋白表达量不高，但也不低；超声过程一直是在冰上进行的；全菌电泳目的蛋白是一条带；降解成3条带后，大部分情况下是有目的融合蛋白的，量比较少；变性纯化后纯度还是挺不错的。FOLR1蛋白；叶酸受体1（FOLR1）重组蛋白两个建议：1、用非变性纯化样品去做EK酶切、纯化。如果融合蛋白的降解是从N端开始的，而C端没有降解，那么应该能够拿到38肽。我曾经有个这么个类似情况，酶切后证实是N端降解，C端的目的蛋白好好的，大小都对。做EK酶切多了，往往会发现，PET32a的融合段硫氧还蛋白加histag部分确实易被进一步酶切水解。但Ni柱的结合特性不变，说明水解是从N端开始的。先做酶切梯度，电泳确定酶量标准。不要用酶说明书的量，有时候差距非常大。和蛋白种类相关。酶切后的纯化方法选Ni柱穿透纯化，可能要加少许咪唑及盐，以利用酶切后的目标蛋白不吸附Ni柱。2、用变性纯化的样品做复性处理FOLR1蛋白；叶酸受体1（FOLR1）重组蛋白变性纯化的样品纯度不错，查阅一下有关的复性方法资料，设计一个方案。你用超滤和透析的方法都失败了，可以考虑用稀释的方法，控制终蛋白浓度小于0.1mg／ml，蠕动泵滴入搅拌的稀释液中，pH控制高的，如pH9-10，适当加一些甘油和EDTA，DTT。影响蛋白原核表达的因素很多，如蛋白的亲水性、密码子的稀有性、蛋白毒性等。如疏水性过强，就难以表达；稀有密码子过多或多个稀有密码子连在一起也难以表达。我以前也遇到过这种情况，首先要分析你的蛋白序列和二级结构，看看是否存在这些影响因素。如果必须要表达全长蛋白，像你这种情况难度就比较大，可以进行密码子的改造，或者更换载体，或者更换宿主菌。看你试验的目的，如果不需要表达全长蛋白，如表达部分抗原性强的片段，可以简单一点，表达部分片段即可。
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